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过氧化氢测定盒 比色法

过氧化氢测定盒 比色法:H2O2是生物体内Z常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。

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过氧化氢测定盒   比色法
货号:BC3590
规格:50T/48S
试剂一:丙酮 100mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 6mL 浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂 4℃保存;
试剂三:液体 12mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。1mmol/mL H 2 O 2 标准液
H 2 O 2 是生物体内zui常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和 POD 等催化降解。H 2 O 2 不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H 2 O 2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面 H 2 O 2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
H 2 O 2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮 100mL、浓盐酸 5mL、
研钵和冰。


一、H 2 O 2 提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备
收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、组织样品的制备
称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取全部上清液(注意吸取干净),置冰上待测。
3、血清(浆)样品
按照每 100μL 血清(浆)加入 1mL 试剂一的比例充分混匀。


注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。


二、测定步骤和加样表
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
4、在 EP 管中按顺序加入下列试剂
试剂名称  测定管  标准管  对照管
样本  吸取的量为全部上清液 
1.25umol/mL 标准溶液  1000 
试剂一  1000
试剂二  100  100  100
试剂三  200  200  200
4000g,常温离心 10min,弃上清,留沉淀
试剂四  1000  1000  1000
加入试剂四溶解沉淀(可用丙酮清洗 3-5 次先洗去植物色素),室温静置 5min,倒入比色皿中,415nm 处,蒸馏水调零,记录测定管吸光度。对照管只需做一次即可。计算∆A 测定=A 测定管-A 对照管,∆A 标准=A 标准管-A 对照管。


三、H 2 O 2 含量计算:
1、按照细菌、细胞个数计算:
细菌或细胞中 H 2 O 2 含量(μmol/10 4 细菌或细胞)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(500×V样本÷V 提取)=0.002×∆A 测定÷∆A 标准。
2、按组织鲜重计算:
组织中 H 2 O 2 含量(μmol/g 鲜重)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W)=∆A 测定÷∆A 标准÷W。
3、按照蛋白浓度计算:
H 2 O 2 含量(μmol/mg prot)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(Cpr×V 样本)=∆A 测定÷∆A 标准÷Cpr。
4、按血清(浆)体积计算:
血清(浆)中 H 2 O 2 含量 μmol/mL 血清(浆)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷V 血清(浆)=10×∆A 测定÷∆A 标准。
500:细胞个数,以万计;C 标液:H 2 O 2 标准溶液浓度,1μmol/mL;V 样本:加入的样本体积,1mL;W:组织鲜重,g;V 提取:提取过程中所用体积,1mL;Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL;V血清(浆):所用血清(浆)体积,0.1mL。

 

过氧化氢测定盒   比色法订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日zui新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短信、电话等形式通知我们。


过氧化氢测定盒   比色法运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果zui少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。


 

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