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羟脯氨酸(HYP)测试盒

羟脯氨酸(HYP)测试盒测定意义:HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

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羟脯氨酸(HYP)测试盒

测定意义:HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一,胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等,因此HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

测定原理:样品经水解产生游离的HYP,进一补被氯胺T氧化,氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应,产生红色化合物,在560nm处有特征吸收峰。通过测定样品水解液560nm吸光值,可计算HYP含量。

自备实验用品及仪器
天平、烘箱、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、6mol/L 盐酸
和蒸馏水。


试剂组成和配制
组织提取液:6mol/L 盐酸,自备。浓盐酸:H 2 O(V/V)= 1:1,室温保存。
细胞提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。


羟脯氨酸提取
1. 组织:称取约 0.5g 样品于玻璃管,加入 5mL 的组织提取液,置于 110℃烘箱,水解 6
至 12 小时,12000g,25℃,离心 20min,用提取液定容至 5mL,取上清待测。
2. 细胞:取 500 万个细胞,加入 2mL 的细胞提取液,于高压消毒器中 15 磅保持 30min,
自然降压后待测。
3. 血清等液体:直接测定。

 

羟脯氨酸含量计算公式
标准曲线:y=64.875x+ 0.0251,R 2 =0.9991
(1)按组织计算
HYP 含量(mg/g)=(A 560 -0.0251)÷ 64.875×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)
= 0.385×(A 560 -0.0251)÷W
(2)按细胞计算
HYP 含量(mg/10 4 cell)=(A 560 -0.0251)÷ 64.875×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量(万个)= 0.154×(A 560 -0.0251)÷细胞数量(万个)
(3)按液体体积计算
HYP 含量(mg/mL)=(A 560 -0.0251)÷ 64.875×V 反总÷V 样

= 0.077×(A 560 -0.0251)
V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL;V 样总:加入提取液体积, mL;
W:样品质量,g


注意事项
1、 OD 值大于 0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2、 试剂有一定的毒性,请操作时做好防护措施,防止吸入或与皮肤接触。
3、 最低检出限为 3.8mg/L。

 

羟脯氨酸(HYP)测试盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日最新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短信、电话等形式通知我们。


羟脯氨酸(HYP)测试盒运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果最少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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