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中性转化酶(NI)测试盒 分光光度法

中性转化酶(NI)测试盒 分光光度法:NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性

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中性转化酶(NI)测试盒   分光光度法
货号:BC0570
规格:50管/24样
测试方法:微量法

 

测定意义:
    蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据zui适 pH,将高等植物Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。                          
    NI主要存在于细胞质中,负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。

 

测定原理:
    NI催化蔗糖分解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性


自备用品:
    可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水

 

产品内容: 提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 50mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂 4℃保存。 试剂三:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。

 

操作步骤: 一、粗酶液提取: 按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提 取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 二、测定步骤及加样表: 按下表操作: 试剂名称(μL) 测定管 标准管 样本 200 200 试剂一 / 800 试剂二 800 / 混匀,37℃准确水浴 30min 后,煮沸 10min 左右(盖紧,以防 止水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变) 试剂三 500 500 混匀,煮沸 10min 左右(盖紧,以防止水分流失),流水冷却后充分混匀,510nm 处蒸馏水调 零,记录各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释 倍数),ΔA=A 测定-A 对照。 N I 活性计算:

 

标准条件下测定的回归方程为 y=0.0016x-0.001;x 为标准品浓度(µg/mL),y 为吸光值。 1、按蛋白浓度计算 单位定义:37℃每 mg 蛋白每分钟产生 1µg 还原糖定义为一个酶活性单位。 NI 活性(U/mg prot)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr)÷T=20.8×(ΔA+0.001) ÷Cpr 2、按鲜重计算 单位定义:37℃每 g 组织每分钟产生 1µg 还原糖定义为一个酶活性单位。 NI 活性(U/g)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=20.8×(ΔA+0.001) ÷W V1:加入反应体系中样本体积,0.2mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本鲜重,g;T:反应时间:30min。

 

中性转化酶(NI)测试盒   分光光度法订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日zui新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

 

中性转化酶(NI)测试盒   分光光度法运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果zui少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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