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谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 可见分光光度法

谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 可见分光光度法:GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

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谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 可见分光光度法

测定意义:GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
测定原理:GLS 催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
需自备仪器和用品:台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:
试剂一×1 瓶,60 mL,4 ℃保存;
试剂二×1 瓶,20 mL,4 ℃保存;
试剂三×1 瓶,30 mL,常温保存;
试剂四×1 瓶,10 mL,常温保存;
试剂五×1 瓶,6 mL,常温保存;
试剂六×1瓶,6 mL,常温避光保存。


粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(10 4 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,
加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。


测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 420nm,蒸馏水调零。
2、样品测定(在 EP 中加入下列试剂):

计算:
1、血清(浆)GLS 活性
单位定义:每 mL 血清(浆)每小时催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
GLS(μmol /min/mL)=363.1×(ΔA-0.1301)÷T=363.1×(ΔA -0.1301)
2、组织、细菌或细胞 GLS 活性
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每 mg 蛋白质每小时催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
GLS(μmol /min /mg prot)=363.1×(ΔA-0.1301)÷Cpr÷T=363.1×(ΔA -0.1301)÷Cpr。
(2)按样本鲜重计算:
单位定义:每 g 组织每小时催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
GLS(μmol /min /g 鲜重)=363.1×(ΔA-0.1301)÷(W÷V 样总) ÷T=363.1×(ΔA -0.1301)÷W。
(3)按细菌或细胞密度计算
单位定义:每 1 万个细菌或细胞每小时催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
GLS(μmol /min /10 4  cell)=363.1×(ΔA-0.1301)÷(500÷V 样总)÷T =0.7262×(ΔA -0.1301)
V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1h;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:
样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。

 

谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 可见分光光度法订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日zui新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


谷氨酰胺酶(GLS)测试盒 可见分光光度法运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果zui少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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